週末をまたぐ腸炎ビブリオ検査とVBNCの落とし穴

腸炎ビブリオの検査では、検体をアルカリペプトン水（APW）などで増菌し、その後TCBS寒天培地に画線塗抹します。このとき、金曜日に増菌を開始し、月曜日に分離培養するというスケジュールを組むことがあります。しかし、この方法には見逃せないリスクがあります。それが、菌のVBNC（Viable but Non-Culturable）状態です。
 

VBNCとは？

VBNCとは、菌が生きているものの培地上でコロニーを形成できなくなる状態です。ストレスや環境変化によって起こり、腸炎ビブリオを含む多くの細菌で確認されています。
 

長時間の増菌で何が起きるのか

APWでの増菌は通常16〜18時間程度が推奨されていますが、金曜から月曜まで放置すると、増菌培養が3日以上続くことになります。この間、
 

• 栄養枯渇
• 酸素量やpHの変化
• 自己代謝産物によるストレス

 
などにより、菌は急激に増殖できなくなり、VBNC状態に移行する危険性があります。その結果、月曜日に分離培養しても、菌がコロニーを形成せず検出感度が大きく低下する可能性があります。
 

冷蔵保存は安全か？

「増菌後に冷蔵庫で保存すればいい」と考える方もいるかもしれません。しかし、増菌後に低温にさらすことは、腸炎ビブリオにとって大きなストレスとなり、むしろVBNC化を促進する可能性もあります。冷蔵保存中に菌は死滅またはVBNC化し、やはり検出感度は低下します。
 

どうすべきか？

• 週末をまたがないスケジュールにする。（木曜までに増菌→分離）
• 週末対応のために検査スタッフを確保する。
• 増菌後はできるだけ早く画線塗抹する。
• 必要ならPCRを併用する

 
週末をまたぐ検査は、検出精度を大きく損なう可能性があることを理解し、計画的に実施することが重要です。
 

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